荧光实时定量PCR检测前列腺癌抗原3评分方法的建立

目的 前列腺癌抗原3(prostate cancer antigen 3,PCA3)基因表达具有前列腺癌特异性,文中建立荧光实时定量PCR(FQ-RT-PCR)检测PCA3评分的方法.方法 分别以LNCap和PC-3细胞株为阳性和阴性对照,用TaqMan探针建立检测PCA3和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA) mRNA的荧光实时定量PCR方法,评价特异性、重复性和计算扩增效率,建立PCA3评分计算公式.结果 检测PCA3和PSA mRNA的批内变异系数分别为1.19%、1.09%、0.84%和0.06%、0.71%、0.79%,批间变异系数分别为1.03%和0.56%;扩增效率分别为0.98和1.00;以2-ΔCt表示PCA3评分.结论 荧光实时定量PCR检测PCA3评分方法的特异性好,重复性高.     

萝卜硫素的体外抗氧化和抑菌活性

目的观察萝卜硫素(SFN)体外抗氧化和抑菌活性。方法试剂盒检测SFN总抗氧化能力(TAC)、抑制超氧阴离子(O2-)活力;水杨酸比色法和邻苯三酚自氧化法检测羟自由基(OH-)与超氧阴离子(O2-)清除能力;滤纸片法检测SFN的抑菌作用,连续二倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)和对大肠杆菌和金色葡球菌生长的抑制。结果 SFN在体外模拟系统中总抗氧化活性和抑制抑制O2-生成活力较高,但对OH-和O2-的直接清除率较低,低于30%。抑菌结果表明SFN对大肠杆菌、金色葡萄球菌、绿脓杆菌、枯草杆菌、表皮葡萄球菌5种受试菌均有较强的抑制作用,MIC为0.78～6.25μg/ml之间。结论 SFN具有较好的抗氧化活性和较强的抑菌效果。     

四种抗癌药物对乳腺癌MDA-MB-435细胞的体外抗肿瘤活性

目的评价表柔比星、紫杉醇、奥沙利铂、羟基喜树碱对乳腺癌MDA-MB-435细胞体外抗肿瘤活性。方法利用MTT比色法初步测定四种抗癌药物对MDA-MB-435细胞体外抑制活性;利用形态学观察考察四种药物对靶标细胞的形态学影响;利用甲瓒结晶生成分析四种药物对细胞的毒杀作用;利用乳酸脱氢酶活力测定评价四种药物对靶标细胞的细胞毒性。结果四种抗癌药物在1μmol/L和10μmol/L对乳腺癌MDA-MB-435细胞都显示出很好的体外抑制活性,其中表柔比星在10μmol/L或者紫杉醇、羟基喜树碱在1μmol/L和10μmol/L对乳腺癌MDA-MB-435抑制率>94%,表柔比星在1μmol/L或者奥沙利铂在1μmol/L和10μmol/L抑制活性相对较低;形态学观察、甲瓒结晶生成和乳酸脱氢酶活性测定表明表柔比星在1μmol/L或奥沙利铂在1μmol/L和10μmol/L毒性较小,而表柔比星在10μmol/L或者紫杉醇、羟基喜树碱在1μmol/L和10μmol/L都显示出明显的细胞毒作用。结论紫杉醇、羟基喜树碱或高浓度表柔比星主要通过细胞毒性发挥抗肿瘤作用;奥沙利铂或低浓度表柔比星则是通过生理途径发挥体外抗癌活性。     

霍山石斛胶囊降血脂疗效的实验研究

目的以高脂血症模型大鼠研究霍山石斛胶囊(DHC)降血脂作用。方法用高脂饲料喂养大鼠4w,建立实验性高脂血症大鼠模型,而后进行低、中、高三种剂量DHC及阳性对照药血脂康实验性治疗,给药4w、6w后检测模型大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,并计算动脉粥样硬化指数(AI);同时测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。结果与高脂血症模型组相比,DHC低、中、高剂量组能不同程度地降低高脂模型大鼠血清TC、TG、LDL-C含量;升高血清HDL-C含量;升高血清SOD活性和NO含量,并降低其MDA含量,且呈量效关系,尤其以DHC中、高剂量组作用最为显著。结论适宜剂量的DHC具有明显的降血脂、保护血管内皮和抗脂质过氧化作用,对高脂血症和动脉粥样硬化的发生有一定的防治作用。     

细支气管肺泡癌患者EGFR基因突变的研究

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）基因酪氨酸激酶域体细胞在细支气管肺泡癌（BAC）患者中突变的相关因素。方法分析和检测本院37例细支气管肺泡癌石蜡包埋标本EGFR基因突变状况,采用PCR技术进行EGFR基因18、19、20和21外显子突变分析。结果37例BAC患者中有18例（48．6％）酪氨酸激酶域存在体细胞突变,其中3例（8．1％）为18外显子替代突变,5例（13．5％）为19外显子突变,7例（18．9％）为20外显子替代突变,8例（21．6％）为21外显子替代突变。结论EGFR基因与BAC密切相关。     

浅析基于案例的节目主持人式医学教学模式的建立

当今时代科技高速发展,可供医学教育工作者选择的教学方法较多。如何把各种方法和手段有机结合,探索适合我国医学专业教学的科学方法成为医学教育工作者必须思考的问题。本文作者对基于案例的节目主持人式医学教学模式的建立进行了探讨和分析。     

长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞株增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、 MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及低表达的乳腺癌细胞株,qRT-PCR方法检测转染后LncRNA GAS5的表达;磺酰罗丹明B染色法检测细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力。结果:LncRNA GAS5在乳腺癌SKBR-3细胞中表达量最低,MCF-7细胞中表达量最高（P<0.01）;SKBR-3以及MCF-7细胞分别转染LncRNA GAS5过表达载体和干扰片段后,SKBR-3细胞LncRNA GAS5表达量增高,MCF-7表达量降低（P<0.01）;下调LncRNA GAS5的表达,细胞的增殖能力升高,侵袭及迁移能力增强（P<0.01）;过表达LncRNA GAS5之后,细胞的增殖能力、侵袭和迁移能力减弱（P<0.01）。结论:LncRNA GAS5是涉及到乳腺癌发展的一个新型的分子,有可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

SPRR1A基因真核荧光表达载体的构建

目的:构建可在真核细胞中表达SPRR1A(small proline-rich repeat protein1A)的荧光表达载体。方法:应用PCR技术扩增出编码SPRR1A的全长基因,将SPRR1A DNA克隆到pEGFP-N1质粒,通过抗性基因筛选阳性克隆,经酶切和测序鉴定。结果:酶切和DNA序列鉴定均证实插入片段与GenBank提供的序列(L05187)一致。结论:成功构建了SPRR1A真核荧光表达载体。     

南药化橘红全球产地适宜性分析

目的:通过化橘红全球产地适宜性分析,为南药化橘红的合理种植和科学产地规划提供重要依据。方法:以化橘红主产区的95个样点为分析基点,结合气温、相对湿度、日照强度、年降水量、土壤类型等关键生态因子值,采用药用植物全球产地适宜性区划信息系统(GMPGIS)对化橘红在全球的生态适宜区域进行分析。结果:化橘红的最大生态相似度区域主要分布于中国、巴西、美国和越南等国家的热带和亚热带区域,总面积约210万km2,其中中国占总面积的60%以上;中国适宜区主要分布于广西、湖南、江西、云南和广东等省。结论:本研究结果为合理规划化橘红种植生产布局,发展引种栽培工作提供了科学参考依据。     

硫化氢对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：观察硫化氢(hydrogen sulfide，H2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的影响。方法：将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8)：正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治 疗(NaHS+DM)组和NaHS对照(NaHS)组。采用腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素复制1型糖尿病大鼠模型。造模成功后， NaHS+DM组和NaHS组大鼠腹腔注射56 μmol/kg NaHS溶液进行干预治疗。8周后，分别测定各组大鼠血清和肾组织中 总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase，T-NOS)、iNOS活性和一氧化氮(NO)水平；测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物 酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)活性；采用透射电镜观察肾皮质超微结构变化；Western印迹检测肾组织iNOS蛋白 表达。结果：与NC组相比，NaHS组各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05)，而DM组大鼠血清和肾组织中T-NOS， iNOS活性和NO水平均显著增高(P<0.01)；肾组织GSH-Px活性明显下降(P<0.01)。电镜观察显示DM组大鼠肾小球基底 膜增厚、系膜基质增多，足突融合；iNOS蛋白表达明显升高。与DM组相比，NaHS+DM组血清和肾T-NOS，iNOS活 性和NO水平明显下降(P<0.01)，GSH-Px活性明显升高(P<0.01)，肾超微结构损伤明显减轻，iNOS蛋白表达显著降低 (P<0.01)。结论：H2S对1型糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用，其机制可能与下调iNOS活性和蛋白表达，降低肾NO生 成相关。